原丙酸三乙酯

以提高3-羟基丙酸的产量为目标,对实验室构建的基因工程大肠杆菌进行改造,敲除形成副产物1,3-丙二醇的主要酶基因——乙醛脱氢酶基因yqh D,得到E.coli W3110Δyqh D(p CDFDuet-tac-gpd1-TUkgsadh/p ACYCDuet-tac-dha B1-4),该工程菌摇瓶发酵产量达到2.53 g/L,相比未敲除yqh D基因的菌株,产量提高了5.8倍。另外,敲除了甘油代谢途径中的抑制因子glpR基因,得到E.coli W3110ΔglpR(p CDFDuet-tac-gpd1-TUkgsadh/p ACYCDuet-tac-dha B1-4),该工程菌摇瓶发酵产量达到2.86 g/L,相比未敲除glpR基因的菌株,产量提高了6.7倍。后经5 L罐发酵培养后,3-羟基丙酸的产量提升到15.4 g/L。该实验为进一步利用大肠杆菌工程菌发酵生产3-羟基丙酸提供了研究基础。

【目的】2，4，6-三甲基苯叉丙二酸二乙酯是合成除草剂肟草酮的关键中间体，前人报道的合成方法收率低，而本文报道了新的合成工艺并研究了催化剂种类、用量、原料摩尔比、反应时间和共沸脱水时间对收率的影响。【结果】以哌啶为催化剂，物料比n（2,4，6-三甲基苯甲醛）：n（丙二酸二乙酯）为1：1．5，哌啶用量与2，4，6-三甲基苯甲醛等摩尔，回流4h后，苯共沸脱水4h，收率可达到97．7％（以2，4，6-三甲基苯甲醛计）；用IR、^1HRMR、元素分析表征了其结构。[结论]在最优条件下，以哌啶为催化剂，2，4，6-三甲基苯甲醛与丙二酸二乙酯通过Knoevenagel缩合高收率获得2．4．6-三甲基苯叉丙二酸二乙酯。