磷酸盐缓冲液用途

主要用于一些化学实验中不影响实验反应的情况下调节pH值，以便让实验的化学反应在最佳条件下进行。部分用于食品或是饲料行业加工，如食品或者饲料真菌毒素检验中Elisa方法的洗板应用或者食品微生物检验中的稀释缓冲液。

先将磷酸盐溶解于500mL蒸馏水中，用1mol/L氢氧化钠溶液校正pH后，再用蒸馏水稀释至1000mL。

取储存液1.25mL，用蒸馏水稀释至1000mL。分装每瓶100mL或每管10mL，121℃高压灭菌15min。

储存液组成成分:

磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline，简称PBS)的是常用的用于生物学研究的一个缓冲溶液。PBS可以为三种溶液的英文缩写，分别是磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered solution)、磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffered saline)及 磷酸盐缓冲钠(phosphate buffered sodium)，其配制方法不同，pH值不同，发挥的生物学作用亦不完全相同。如无特殊说明，生物学上常用的PBS是中性磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered solution)。它是一种水基盐溶液中含有氯化钠，磷酸盐，以及(在某些配方)氯化钾和磷酸钾。缓冲液有助于保持恒定的pH值。溶液的渗透压和离子浓度通常与人体pH相近(等渗)。

PBS(Phosphate Buffered Saline)，可用PB磷酸盐缓冲液加入NaCl或者KCl进行配制，译名为磷酸盐缓冲生理盐水,也经常被人叫做磷酸盐缓冲液，主要用于细胞实验，NaCl，KCl的作用为调节渗透压。简称:PB或者PB缓冲液

1、磷酸盐缓冲液(PBS，0.03mol/L，pH7.2) 无水磷酸氢二钠 2.83g 磷酸二氢钾 1.36g 蒸馏水加至 1000ml 将各成分加入到1000ml 蒸馏水中，待完全溶解后，调 pH 至7.2~7.4，于121℃ 压力蒸气灭菌20min备用。

2、硫代硫酸钠中和剂(0.1-1.0%) pH7.2-7.4 0.03mol/L磷酸盐缓冲液 100 ml 硫代硫酸钠 0.1-1.0g 于121℃ 压力蒸气灭菌15min备用。

3、吐温80中和剂 (0.5-1.0%) pH7.2-7.4 0.03mol/L磷酸盐缓冲液 100 ml 吐温80 0.5-1.0g 于121℃ 压力蒸气灭菌15min备用。

4、2%戊二醛中和剂: 500 ml PBS+2.5g 甘氨酸(氨基乙酸)+2.5g卵磷脂+2.5g吐温80

5、碘伏中和剂:1000 ml PBS+硫代硫酸钠10g

6、75%乙醇中和剂:3%吐温PBS，如500 ml PBS+1.5g吐温80

7、酸性氧化电位水中和剂:0.5%硫代硫酸钠PBS缓冲液(pH7.2) 如"500 ml PBS+2.5 g硫代硫酸钠

8、对于特殊消毒剂的中和剂，根据厂家提供的资料选用合适的中和剂。

青霉素溶液

称取青霉素钠(钾)适量，用磷酸盐缓冲液(pH7.0)溶解成每1ml中含青霉素1万单位的溶液。

青霉素酶稀释液

取青霉素酶溶液，按估计单位用磷酸盐缓冲液(pH7.0) 稀释成每1ml中约含青霉素酶8000~12 000单位的溶液，在37℃预热。

测定法

精密量取青霉素溶液50ml,置100ml量瓶中，预热至37℃后，精密加入已预热的青霉素酶稀释液25ml，迅速混匀，在37℃准确放置1小时，精密量取3ml，立即加至已精密量取的碘滴定液(0.01mol/L)[精密量取碘滴定液(0.1mol/L)10ml，置100ml量瓶中，用醋酸钠缓冲液(pH4.5)稀释至刻度]25ml中,在室温暗处放置15分钟，用硫代硫酸钠滴定液(0.01mol/L) 滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失。

空白试验

取已预热的青霉素溶液2ml，在37℃放置1小时，精密加入上述碘滴定液(0.01mol/L)25ml，然后精密加青霉素酶稀释液1ml，在室温暗处放置15分钟，用硫代硫酸钠滴定液(0.01mol/L)滴定。按下式计算:

E=(B-A)×M×F×D×100

式中

E为青霉素酶活力，(单位/ml)/小时;

B为空白滴定所消耗的上述硫代硫酸钠滴定液的容量，ml;

A为样品滴定所消耗的上述硫代硫酸钠滴定液的容量，ml;

M为硫代硫酸钠滴定液的浓度，mol/L;

F为在相同条件下，每1ml的上述碘滴定液(0.01mol/L)相当于青霉素的单位数;

D为青霉素酶溶液的稀释倍数。

[附注]

磷酸盐缓冲液(pH7.0)

取磷酸氢二钾7.36g与磷酸二氢钾3.14g,加水使成1000ml。

醋酸钠缓冲液(pH4.5)

取冰醋酸13.86ml,加水使成250ml;另取结晶醋酸钠27.30g,加水使成200ml，两液混合均匀。