磷酸缓冲液配制

磷酸缓冲液PH5.7--8.0(0.2M)

甲液:

NaH2PO4·2H2O:Mr=156.03，0.2mol/L溶液为31.21g/L，

NaH2PO4·H2O:Mr=138.01，0.2mol/L溶液为27.6g/L。

乙液:

Na2HPO4·2H2O:Mr=178.05，0.2mol/L溶液为35.61g/L，

Na2HPO4·7H2O:Mr=268.13，0.2mol/L溶液为53.624 g/L ，

Na2HPO4·12H2O:Mr=358.22，0.2mol/L溶液为71.64g/L。

磷酸缓冲液PH5.7--8.0(0.2M)

PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml)

5.7 93.5 6.5 6.9 45 55

5.8 92 8 7.0 39 61

5.9 90 10 7.1 33 67

6 87.7 12.3 7.2 28 72

6.1 85 15 7.3 23 77

6.2 81.5 18.5 7.4 19 81

6.3 77.5 22.5 7.5 16 84

6.4 73.5 26.5 7.6 13 87

6.5 68.5 31.5 7.7 10.5 89.5

6.6 62.5 37.5 7.8 8.5 91.5

6.7 56.5 43.5 7.9 7 93

6.8 51 49 8.0 5.3 94.7

根据要求的PH值,取X毫升甲液与Y毫升乙液,混合均匀即得.

磷酸缓冲液PH4.49--9.18(1/15M)

PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml) PH 甲液X(ml) 乙液Y(ml)

4.4 90 10 6.98 64

4.9 4 0. 1 9.9 7.71 7 3

5.29 0.25 9.75 7.58 8 2

5.59 0.5 9.5 7.75 9 1

5.91 1 9 8.04 9.5 0.5

6.24 2 8 8.2 9.7 0.3

6.47 3 7 8.54 9.75 0.25

6.64 4 6 8.68 9.9 0.1

6.81 5 5 9.18 10 0

乙液:一水磷酸二氢钠,1/15M溶液含9.2g/L

甲液:二水磷酸氢二钠,1/15M溶液含11.864g/L

根据要求的PH值,取X毫升甲液与Y毫升乙液,混合均匀即得.

PBS(Phosphate Buffered Saline)，可用PB磷酸盐缓冲液加入NaCl或者KCl进行配制，译名为磷酸盐缓冲生理盐水,也经常被人叫做磷酸盐缓冲液，主要用于细胞实验，NaCl，KCl的作用为调节渗透压。简称:PB或者PB缓冲液

磷酸缓冲液的缓冲pH值范围非常广泛，可配置各种pH值的酸性、碱性和中性缓冲液，配制酸性缓冲液可直接用NaH2PO4或KH2PO4，pH范围在1-5;碱性缓冲液可直接用Na2HPO4或K2HPO4，pH范围在9-12;中性缓冲液则用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，pH在5.5-8.5。

通常所说的磷酸缓冲液的浓度是指溶液中含有的所有的磷酸根离子的浓度，而不是钠离子(Na+)或者钾离子(K+)的浓度。正是因为如此，在配制中性缓冲液时，用等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液混合，并不影响磷酸根离子的浓度，所得的缓冲液浓度仍是等浓度的NaH2PO4和Na2HPO4或者等浓度的KH2PO4和K2HPO4溶液原来的浓度，但是缓冲液中的钠离子(Na+)或者钾离子(K+)的浓度已经发生变化。

只要知道缓冲对的PH值，和要配制的缓冲液的pH值(及要求的缓冲液总浓度)，就能按公式计算[盐]和[酸]的量。这个算法涉及对数换算，较麻烦，前人为减少后人的计算麻烦，已为我们总结出pH值与缓冲液对离子用量的关系并列出了表格。只要我们知道要配制的缓冲液的pH，经查表便可计算出所用缓冲剂的比例和用量。例如配制500nm pH5.8浓度为0.1M磷酸缓冲液。

经查表知pH5.8浓度为0.2M Na2HPO48.0毫升(1M=1 mol/L)，而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可推论出配制100ml 0.1M的磷酸缓冲液需要0.1M Na2HPO48.0毫升，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。

计算好后，按计算结果准确称好固态化学成分，放于烧杯中，加少量蒸馏水溶解，转移入50ml容量瓶，加蒸馏水至刻度，摇匀，就能得到所需的缓冲液。

各种缓冲溶液的配制，均按表格按比例混合，某些试剂，必须标定配成准确浓度才能进行，如醋酸、氢氧化钠等。另外，所有缓冲溶剂的配制计量都能从以上的算式准确获得。