黄花小山菊繁殖方法

材料类别：黄花小山菊的茎尖。

培养条件：基本培养基为MS。丛生芽诱导和增殖培养基：MS 6-BA1毫克/升 NAA0.01毫克/升；MS 6-BA3 NAA0.01毫克/升；MS 6-BA5 NAA0.01毫克/升。生根培养基：1/2MS NAA0.01毫克/升；1/2MS NAA0.03毫克/升；1/2MS NAA0.05毫克/升。以上各培养基均含3%蔗糖和0.6%琼脂，培养温度为（25±1）℃，光照时间14小时/天，光强20-40微摩尔/（平方米·秒）。

生长分化：⑴外植体的灭菌与接种取黄花小山菊茎尖，长约1厘米，流水冲洗2-3小时，70%酒精消毒30s，无菌水冲洗4次，再经0.1%小时氯化汞消毒4-5分钟，无菌水冲洗4次，备用。切取茎尖组织，长0.5-0.6厘米，接种于丛生芽诱导和增殖培养基中，每瓶接种3个外植体，每种培养基接种10瓶。⑵丛生芽的诱导与增殖接种大约2周后，可长出愈伤组织，1个月后，可分化出大量的丛生芽。将丛生芽接种于诱导和增殖培养基上，每种培养基接种10瓶，使其增殖，一般15天后可长出丛生芽；取丛生芽转接于新的诱导和增殖培养基上，使之扩繁到所需数量。3种诱导和增殖培养基均可分化出丛生芽，但不同浓度的生长调节物质诱导和增殖率不同：MS 6-A1 NAA0.01毫克/升对黄花小山菊的诱导分化最好，达到95%，且丛生芽多，生长健壮，叶色绿；而6-BA浓度为3和5毫克/升时，诱导率分别为80%和40%，且丛生芽较少，叶色黄。增殖培养基效果与诱导分化培养基相同，因此，MS 6-BA1 NAA0.01毫克/升为丛生芽诱导和增殖较适宜的培养基。

诱导生根：将丛生芽分成单株，分别接种于生根培养基上，进行生根诱导，20天后可长出大量根。3种添加不同浓度NAA的生根培养基上都可诱导黄花小山菊生根，但诱导生根的情况不同：NAA浓度为0.05毫克/升时生根长而多，生根率为96%，且生长健壮；NAA为0.03和0.01毫克/升的培养基生根率分别为90%和82%，根生长健壮。

分布于中国四川（康定）和陕西（太白山）。生长在海拔1400-3850米的山坡草甸。

基生叶扇形或宽卵形，长0.4-1.6厘米，宽0.8-1.6厘米，二回掌状或掌式羽状分裂， 一二回全部全裂。茎叶小，与基生叶同形，上部茎叶常羽裂，最上部叶3裂。全部叶下面被短柔毛，稠密或稀疏，上面稀毛至无毛，末回裂片线形或宽线形，宽 0.5-1毫米。基生叶的叶柄长达2厘米。

头状花序单生茎顶，直径2-3.5厘米。总苞浅碟形，直径1-2厘米。总苞片4层，外层线形、线状披针形，长5-6毫米，中内层披针形或椭圆形，长7-9毫米。全部苞片外面无毛或有稀疏的长柔毛，边缘棕褐色或褐色膜质。舌状花黄色，舌片长6-12毫米。花期9月。

将生根后的试管苗瓶于中午移至温室内，封口炼苗3天，再把封口膜的皮套松开，3天后把封口膜打开，再炼苗3天。用清水洗净根部琼脂，栽种至灭过菌的河沙中，浇透水，喷施0.5%绿亨2号，以促进生根和防止烂根，按常规管理，10天后，移栽成活率达96%。

全球菊属植物约有39种，除紫花野菊间断分布在欧亚大陆山区外，其它种类多分布在中国和日本以及俄罗斯，中国菊属植物种类约有22种。已经收集到绝大多数的中国产野生种类，发现其中高海拔地区原产的菊属植物，尤其是高山植物如黄花小山菊、紫花野菊在北京地区露地栽培适应性很差，尤其是越夏很难，这就增加了菊属植物基因库的保存难度，有时不得不多次到原产地再引种收集。黄花小山菊组培快繁的成功，为黄花小山菊甚至更多的菊属植物的进一步保存、研究和利用提供了有益的借鉴。

中国三北地区荒漠和半荒漠区面积巨大，需要大量的抗寒、抗旱性极强的地被植物。菊花种间的杂交已经很难满足这一要求，通过属间杂交，扩大基因库，可以弥补品种间杂交和种间杂交的局限性。黄花小山菊的为菊属间杂交提供种质资源，进一步提高地被菊在西北荒漠、半荒漠地区的适应性。