醋酸丙氨瑞林测定方法

方法名称:

醋酸丙氨瑞林-醋酸丙氨瑞林的测定-高效液相色谱法

应用范围:

本方法采用高效液相色谱法测定醋酸丙氨瑞林的含量。

本方法适用于醋酸丙氨瑞林。

方法原理:

供试品用流动相溶解并稀释成一定浓度的溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长220nm处检测醋酸丙氨瑞林的吸收值，计算出其含量。

试剂:

1. 乙腈(色谱纯)

2. 水(色谱纯)

3. 磷酸溶液:0.01mol/L

4. 三乙胺

仪器设备:

1. 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按醋酸丙氨瑞林计算应不低于 2000。

1.3 紫外吸收检测器

2. 色谱条件

2.1 流动相:0.01mol/L磷酸溶液(用三乙胺调节pH值至3.0):乙腈= 80 20

2.2 检测波长:220nm

2.3 柱温:室温

试样制备:

1. 对照品溶液的制备

精密称取醋酸丙氨瑞林对照品适量，加流动相溶解并定量稀释成每1mL中含0.5mg的溶液。

2. 供试品溶液的制备

精密称取本品适量，加流动相溶解并定量稀释成每1mL中约含0.5mg的溶液。

注:"精密称取"系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。"精密量取"系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤:

分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各10μL 注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器，于波长220nm处测定醋酸丙氨瑞林的吸收值，计算出其含量。

参考文献:

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005年版，一部，p837。

照高效液相色谱法(附录Ⅴ D)测定。 色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.1mol/L磷酸溶液(用三乙胺调节pH值至 3.0)-乙腈(80:20)为流动相;检测波长为220nm。理论板数按醋酸丙氨瑞林峰计算不低于2000。 测定法 取本品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液，精密量取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图;另取醋酸丙氨瑞林对照品，同法测定.按外标法以峰面积计算，即得。

溶液的澄清度与颜色 取本品20mg，加水2ml溶解后，溶液应澄清无色;如显色，与黄色2号标准比色液(附录Ⅸ A)比较，不得更深。 醋酸 取本品适量，精密称定，加稀释液〔流动相A-流动相B(95:5)〕溶解并稀释制成每1ml中约含10mg的溶液，作为供试品溶液;另取冰醋酸适量，精密称定，加稀释液稀释制成每1ml中约含0.60mg的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱治(附录Ⅴ D)测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸溶液(取磷酸0.7ml，加水1000ml，用氢氧化钠试液调节pH值至3.0)为流动相A，甲醇为流动相B，进行梯度洗脱，检测波长为210nm。理论板数按醋酸峰计算，不低于2000。梯度洗脱程序如下: 时间(分钟) 流动相A(%) 流动相B(%) 0 95 5 5 50 50 20 50 50 25 95 5 精密量取对照品溶液和供试品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。含醋酸不得过7.5%。 氨基酸比值 取本品，加6mol/L盐酸溶液，于110℃水解24小时后，用氨基酸分析仪式适宜的高效液相色谱仪测定，供试品中各氨基酸与丙氨酸摩尔比应符合以下规定:丝氨酸为0.7-1.0，谷氨酸为0.9-1.1，脯氨酸为0.8-1.0，亮氨酸为0.9-1.1，酪氨酸为0.9-1.1，组氨酸为0.9-1.1，精氨酸为0.9-1.1。 有关物质 取本品，加水制成每1ml中含0.5mg的溶液，作为供试品溶液;精密量取1ml，置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。照含量测定项下的色谱条件，取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰高约为满量程的50%;精密量取对照品溶液和供试品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍，供试品溶液的色谱图中，除溶剂峰外，单个杂质峰面积不得大于对照溶液峰面积的2倍.各杂质峰面积的和不得大于对照溶液峰面积的5倍(任何小于对照溶液主成分峰面积0.05倍的峰可忽略不计)。 水分 取本品，依法测定(附录Ⅷ M第一法A)。含水分不得过7.0%。

(1)在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。 (2)取本品与醋酸丙氨瑞林对照品，分别加水制成每1ml中约含2mg的溶液，照薄层色谱法(附录 B)试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-冰醋酸-水(60:45:6:14)为展开剂，展开，晾干，熏氯气(在一容器底部，放一烧杯，加入5%高锰酸钾溶液10ml，再加盐酸3ml，密闭)，晾干，再喷以碘化钾淀粉指示液使显色，供试品溶液所显主斑点的颜色和位置应与对照品溶液的斑点相同。

汉语拼音: Cusuan Bing anruilin

英文名: Alarelin Acetate

吸收系数 取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液，照紫外-可见分光光度法(附录ⅣA)，在279nm的波长处测定吸光度，按无水、无醋酸物计算，吸收系数(E 1%/1cm)为52-57。

遮光、密封，在干燥处保存。

注射用醋酸丙氨瑞林

本品为5-氧代脯氨酰-组氨酰-色氨酰-丝氨酰-酪氨酰-D-内氨酰-亮氨酰-精氨酰-脯氨酰-乙胺的醋酸盐。按无水、无醋酸物计算，含C56H78N18O12应为95.0%-103.0%