中国石竹离体快繁与试管苗玻璃化

研究了大量元素浓度、琼脂浓度、光照对丽佳秋海棠试管苗玻璃化的影响,结果表明:不同培养条件对丽佳秋海棠试管苗玻璃化影响的程度不同,适当减少大量元素的用量、提高琼脂浓度和光照强度,可有效地降低玻璃化苗的数量,且对丽佳秋海棠试管苗增殖、生长、生根有较好的促进效果。

[目的]研究大果紫檀试管苗出现玻璃化的影响因素。[方法]以大果紫檀的无菌种子苗为材料,研究ms培养基附加不同激素组合及改良ms培养基中nh+4离子、ga2+离子浓度对大果紫檀试管苗玻璃化的影响。[结果]当tdz浓度大于0.03mg/l时,大果紫檀玻璃化比率会大幅上升,而kt不会导致大果紫檀试管苗出现玻璃化;适当降低培养基中nh+4离子浓度及提高ga2+离子浓度,也能降低试管苗玻璃化发生的比例。[结论]激素种类和浓度是影响大果紫檀试管苗玻璃化的主要因素,低浓度的tdz既能高效诱导大果紫檀试管苗增殖,又能使试管苗的玻璃化比率处于较低的水平。

采用分离群体分组分析法(bsa),用100个随机引物对满天星的正常苗和玻璃化苗进行rapd分析的结果表明,7个随机引物扩增出多态性差异条带。再用上述7个引物分别对试管苗及其玻璃化苗个体进行dna的pcr扩增的结果显示,引物j20在2种苗中出现差异条带。

以色素万寿菊种子萌发苗为外植体,对色素万寿菊试管苗玻璃化现象进行了研究。结果表明:防止色素万寿菊试管苗玻璃化的有效措施为:使用0.1mg/l6-ba,添加0.01mg/lnaa;采用浓度50g/l的蔗糖;采用浓度1.2%的琼脂;添加浓度0.1%的活性炭;采用浓度1.8g/l的聚乙烯醇。

在本文中利用解剖学方法,对满天星试管正常苗和玻璃苗叶片解剖结构进行了观察比较,结果表明:二者的表皮均由单层细胞构成,气孔突出,叶肉组织无细胞的分化,是等面叶,且叶肉中通气组织发达。与试管正常苗相比,玻璃苗的叶片厚,气孔突出明显,表皮细胞、叶肉细胞体积膨大,有的叶肉细胞的细胞壁发育不全,在某些区域出现空洞,壁的形态呈现不完整的现象。玻璃苗叶片的维管组织呈现退化的状态。

以菊花组培苗为试材,对菊花玻璃化苗和正常苗的生理特性进行比较。测定了组织含水量、叶绿素、可溶性糖、蔗糖、可溶性蛋白5个指标。玻璃化苗的组织含水量、可溶性糖含量高于正常苗,叶绿素a、叶绿素b、蔗糖、可溶性蛋白含量明显低于正常苗。说明玻璃化苗与正常苗在光合能力、蛋白质合成和糖代谢方面显著不同。

通过在培养基中加入不同质量浓度6-ba、naa、蔗糖、琼脂、活性碳并进行正交试验,得出影响红檵木玻璃化苗发生的因素及其影响力大小顺序为6-ba>活性碳>琼脂>naa>蔗糖。6-ba的质量浓度大于2mg/l,会大大增加玻璃化苗的产生。考虑到增殖率,应适当加入少量活性碳或聚乙烯醇。此外,减少继代次数,选择中部节段作为外植体,也有利于玻璃化率的降低。

面包面团分别贮存在家用冰箱(-18℃,非玻璃态贮存)和超低温冰箱(-88℃,玻璃态贮存)中,采用质构仪分析面团在贮存0、7、30、90d后的面团质构特性,并测定面包比体积。结果表明:(1)非玻璃态贮存面团的黏度、延展性先升高后降低,变化幅度大,而面团弹性、弹性恢复比快速下降;(2)玻璃态贮存面团的黏度、延展性先降低,而后缓慢升高,面团弹性随贮存时间小幅下降、弹性恢复比基本无变化;(3)面包比体积变化情况与面团弹性变化情况相似,说明面团的弹性能较好地反映面包的比体积。玻璃态贮存可以降低重结晶反应速率,减少大冰晶生成,降低面团在贮存过程中的面筋网络破坏;可以降低面团中水分活性,减小水分迁移速率,防止淀粉过度水化。

【目的】解决樱桃砧木吉赛拉组培快繁生产中玻璃化苗发生及污染问题。【方法】通过对培养基中激素、蔗糖、琼脂浓度的调节及培养温度的控制,防止玻璃化苗发生;通过培养基中加入杀菌剂,寻求解决组培苗污染。【结果】培养基中细胞分裂素6-ba的浓度控制在1mg/l以下、蔗糖浓度40g/l、琼脂浓度6g/l左右、培养温度24℃左右,可有效地预防玻璃化苗的发生;在培养基中加入500～1000mg/l多菌灵50%可湿性粉剂,可有效防止污染的发生。【结论】在樱桃砧木吉赛拉5号组培快繁中,细胞分裂素6-ba浓度、蔗糖浓度、琼脂浓度、培养温度对试管苗产生玻璃苗都有一定的影响,其中,细胞分裂素6-ba浓度、培养温度的影响更为明显。为了防止污染的发生,培养基中添加多菌灵50%可湿性粉剂效果较好。

以网纹甜瓜品种‘中蜜1号’为试材,在其不同培养阶段添加不同浓度agno3,检测不定芽的诱导率和增殖率、玻璃苗发生率和生根情况的结果表明,添加agno3后,子叶的愈伤组织诱导率下降,添加70μmol·l-1agno3可促进不定芽的诱导,50～60μmol·l-1agno3明显促进不定芽增殖,并完全抑制玻璃苗的产生,添加50μmol·l-1agno3的生根最好。

非洲茉莉组织培养以带茎尖茎段为最佳外植体;6-ba2.0mg/l+naa0.1mg/l的组合诱导率最高,顶芽诱导率达83.3%,不定芽诱导率达43.3%;在6-ba2.0mg/l+kt0.1mg/l+naa0.1mg/l培养基中进行继代,增殖倍数最高可达4倍;ms附加iba0.5mg/l诱导生根最为适宜,生根率达98%。

玻璃化温度 复材030刘倩0311627 玻璃化转变是高聚物的一种普遍现象，因为即使是结晶高聚物，也难以形 成100％的结晶，总有非晶区存在。在高聚物发生玻璃化转变时，许多物理性能 发生了急剧的变化特别是力学性能。在只有几度范围的转变温度区间前后，模量 将改变三到四个数量级，使材料从坚硬的固体，突然变成柔软的弹性体，完全改 变了材料的使用性能。作为塑料使用的高聚物，当温度升高到发生玻璃化转变时， 失去了塑料的性能，变成了橡胶；而作为橡胶使用的材料，当温度降低到发生玻 璃化转变时，便丧失橡胶的高弹性，变成硬而脆的塑科。因此，玻璃化转变是高 聚物的一个非常重要的性质。研究玻璃化转变现象，有着重要的理论和实际意义。 而玻璃化温度是在决定应用一个非晶高聚物之前需要知道的一个最重要的 参数，如何测量这一参数自然也是很重要的。另一方面对玻璃化转变现象的研究， 也必须解决

由于面团在冷冻储存过程中受到结晶与再结晶的影响,产生结构松弛和水份迁移,品质显著下降。实现面团的玻璃化储存是解决问题的最佳方案。通过加入合适添加剂,可提高面团玻璃化转变温度,实现一般冷冻储存温度(-18℃)下的面团玻璃化储存。分析了各种玻璃化转变温度测定方法和添加剂在提高面团玻璃化转变方面的应用。

试管离心管等玻璃仪器的干燥、保管知识和洗涤妙法 点击次数：651发布日期：2010-3-10来源：本站仅供参考，谢绝转载，否则责任自负 一、玻璃仪器的干燥 做实验经常要用到的仪器应在每次实验完毕之后洗净干燥备用。用于不同实验的仪器对干燥有不同的要求， 一般定量分析中的烧杯、锥形瓶等仪器洗净即可使用，而用于有机化学实验或有机分析的仪器很多是要求 干燥的，有的要求无水迹，有的要求无水。应根据不同要求来干燥仪器。 1、晾干（控干）不急用的，要求一般干燥，可在纯水涮洗后，在无尘处倒置挖去水分，然后自然干燥。可 用安有斜木钉的架子和带有透气孔的玻璃柜放置仪器。 2、烘干洗净的仪器控去水分，放在电烘箱中烘干，烘箱温度为105—120℃烘1h左右。也可放在红外灯干燥 箱中烘干。此法适用于一般仪器。称量用的称量瓶等烘干后要放在干燥器中冷却和保存。带实心玻璃塞的 及厚壁仪器烘干时要注意慢慢

比较了玻璃化与包埋玻璃化超低温保存怀地黄[rehmanniaglutinosa(gaertn.)libosch]‘85-5’带芽茎段的效果。结果表明:4℃低温锻炼5d,在添加二甲基亚砜(dmso)和乙酰胺的培养基中预培养3d,60%pvs2室温装载25min,pvs20℃脱水30min时,玻璃化和包埋玻璃化两种保存方法均得到本试验条件下最佳结果;两种方法相比,玻璃化法的存活率和再生率均较包埋玻璃化法高,前者的存活率(88.92%)和再生率(64.29%)分别是后者的1.38倍和2.41倍。可见,采用超低温保存怀地黄种质资源是可行的,且玻璃化法优于包埋玻璃化法。

玻璃化学强化介绍

利用非试管快繁技术,对广西横县"中华茉莉园"9个茉莉品系及11个茉莉家族成员品系进行了快繁试验研究。结果表明,绝大部分品系在非试管快繁苗床生根率达到75%以上,17个品系移栽成活率超过90%,仅越南茉莉一个品系移栽成活率仅为74.6%。从整个试验结果来看,非试管快繁技术能有效繁育各种茉莉及其家族成员品系,这将为"中华茉莉园"茉莉品系保护和广西横县茉莉产业发展打下坚实的基础。

为探讨不同培养条件对白花丹参组培苗玻璃化的影响,以白花丹参不育变异品种的幼嫩茎段为外植体,以ms为基本培养基,研究了kt/naa比例、活性炭添加及琼脂浓度对防治白花丹参组培苗玻璃化现象的作用。结果表明,当kt浓度为1.5mg.l-1、naa浓度为0.5mg.l-1、培养基中添加0.3%活性炭、琼脂浓度为0.8%时,白花丹参组培苗增殖系数较高,玻璃化率低,炼苗成功率最高。因此,ms+kt1.5mg.l-1+naa0.5mg.l-1+琼脂0.8%+活性炭0.3%的培养基可以有效防治白花丹参组织培养中的玻璃化现象。

玻璃化是非受伤胁迫条件下试管苗的一种生理病变,试管苗的玻璃化,严重影响了微体快速繁殖的效率。综述国内外研究发现,木本植物试管苗玻璃化的形成,与培养基中糖(碳源)浓度、琼脂种类及浓度、离子(主要为cu2+)含量、细胞分裂素、乙烯及生长素等因子有关;过氧化物酶-iaa氧化酶体系对乙烯释放的控制,苯丙氨酸解氨酶和酸性过氧化物酶活性降低对木质化过程进行的抑制以及纤维素、木质素的缺乏,细胞壁压的降低等,均使得细胞过分吸水,从而导致木本植物玻璃化的发生。国内外试管苗玻璃化的控制技术主要有:增加固体培养基中琼脂浓度和蔗糖含量;降低培养基中cl-、nh4+的浓度及细胞分裂素含量,或向培养基中加入间苯三酚或根皮苷;材料需经低温处理并降低环境中的相对湿度。

利用组织培养繁殖满天星，既能保持原品种固有的优良特性，又可以在短时间内获得大量苗木，是满天星快速繁殖的一种有效方法〔１〕。但是满天星在继代培养中，很容易发生玻璃化苗，影响试管苗生根和移栽，降低了繁殖系数。在试管苗继代培养中玻璃化苗的产生除与培养条件有...

香石竹（dianthuscaryophyfllusl.）为石竹科石竹属常绿亚灌木花卉,是世界著名的切花之一,其栽培种及野生种的资源有效保存对香石竹的国产化至关重要。超低温保存（-196℃）是无性繁殖的植物种质资源最安全经济的保存方法。超低温保存方法中常用的为玻璃化法,近年来在传统玻璃化法上发展出来小液滴法,即将植物材料经玻璃化处理后,在铝箔上滴成小液滴,后直接投入液氮进行迅速冷冻。由于冻存及解冻速度快,组织不易形成冰晶,易成活再生,是一有发展前景的方法。超低温保存中,茎尖大小及结构的完整性对超低温保存的成活率及恢复培养均有影响。我们以香石竹为模式植物,结合包埋法及小液滴法的特点,对相关技术进行改进,探索一种适用于植物茎尖超低温保存方法及冷冻植株后再生的技术。试材为香石竹红花品种,从上海花卉市场购买。切取花茎繁殖试管苗,获得花茎无性繁殖系。取组培继代3个月以上的无菌组培苗。茎尖超低温保存的试验方法为：1、常规玻璃化法：（1）剥取1～2mm无菌苗茎尖,接种到含0.3mol·l-1蔗糖浓度的ms培养基中,在25℃下培养1～3d;（2）经预培养后,将茎尖置于含预处理液（含2mol·l-1甘油及0.4mol·l-1蔗糖的ms培养液）的2ml冷冻管中,于室温下处理60min,然后将预处理液吸出,换入预冷玻璃化保护剂pvs2中在冰浴中处理60～120min;（3）冷冻管换入预冷新鲜pvs2约0.5ml,迅速投入液氮中保存。解冻取出在液氮中冻存1h以上的冷冻管,立即放入40℃水浴中快速解冻2min。（4）茎尖在室温下用含1.2mol·l-1蔗糖的ms培养液洗涤2～3次,每次5～10min。（5）洗涤后的茎尖在滤纸上吸干后,转移至恢复培养基中暗培养,等茎尖返绿并有萌动迹象时再转入ms固体培养基中常光培养。2、小液滴法：步骤（1）、（2）同常规玻璃化法;（3）在冻存前5min将含有1个茎尖的液滴（约5ul）滴在5mm×20mm的无菌铝箔条上,每个铝箔条含5个茎尖,将含液滴的铝箔条直接投入装满液氮的安培管中。（4）解冻时直接将含液滴的铝箔条投入洗涤液中进行解冻20min。步骤（5）同上。3、改良小液滴法：（1）剥取1～2mm无菌苗茎尖,浸入2%的无钙离子海藻酸钠溶液中轻蘸,即用镊子将茎尖轻放在3mm×20mm无菌滤纸小条上,每个滤纸条上放5～10个茎尖;（2）将含有茎尖的滤纸小条浸入到0.1%氯化钙溶液中,经10min固定,在无菌滤纸上吸干多余液体;（3）将带有茎尖的滤纸小条放入0.3mol·l-1蔗糖的ms液体或固体培养基中,培养1～3d;（4）经预培养后,将带有茎尖的滤纸小条置于预处理液（含2mol·l-1甘油及0.4mol·l-1蔗糖的ms培养液）中于室温下处理60min,然后转入玻璃化保护剂pvs2中在冰浴中处理60～120min;（5）将带有茎尖的滤纸小条直接投入液氮中,长期保存可转移至无菌冷冻管;（6）解冻时将带有茎尖的滤纸小条由管中拿出后迅速放入含1.2mol·l-1蔗糖的ms培养液解冻及洗涤20min;（7）将带茎尖的滤纸条在无菌滤纸上吸干后放入恢复培养基进行培养,经恢复培养后茎尖可直接生长成植株。结果表明：3种玻璃化法冻存的香石竹茎尖成活率及再生率均可达80%。其中小液滴玻璃化法在优化程序下进行冻存,最高存活率可达95%,高于常规玻璃化法（82%）及改良小液滴玻璃化法（87%）。恢复培养时,最快1d即可见茎尖萌动,再生时间较常规玻璃化法要短3～5d,但再生率不稳定（60%～100%）,易形成愈伤组织及玻璃化苗。改良小液滴法成活率（80%～90%）略高于常规玻璃化法,再生时间与常规玻璃化法相同（7～13d）,植株再生率均在80%以上且植株生长健壮一致。改良小液滴法结合包埋法及小液滴法的特点,并采用滤纸小条为操作载体,以批量处理茎尖以提高操作效率,减少在操作过程中机械损伤,从而达到稳定的成活率及再生率,受操作者水平影响较小,可用于种质库批量化植物茎尖资源超低温保存。

在培养基为ms+iaa1.0mg/l+蔗糖30g/l+琼脂5.5g/l,ph5.8～6.0;培养条件为25～27℃/12h,给光(2000lx)、19～20℃/12h,不给光,采用瓶内单芽茎段增殖路线,可以有效地控制香石竹、满天星在组培快繁中极易出现的玻璃化现象。