免疫组化标准操作规程 一、 实验目的： 蛋白物质的定性、定位检测。 二、 实验原理： 基于利用放射性核素和其他标记物（荧光素，酶，重金属离子等）作为示踪剂，通过免 疫亲和（抗原 -抗体特异性结合）和核酸杂交（碱基配对特异性连接）途径，在组织切片或 细胞涂片上，原位显示生物大分子的动态变化而建立的一门染色技术。 三、 实验准备 材料： 移液器（ P1ml，P200，Gilson） 吸头（ 10 ul ，100 ul ，1000 ul ，Axygen） 6cm、10cm 培养皿（ corning） EP管（ 1.5mL） 试剂： 胎牛血清 (10099-141 Invitrogen) 1mol/L 的 TBS 缓冲液 0.01 mol/L 柠檬酸盐缓冲液（ CB，pH6.0 ，1000ml ）：柠檬酸三钠 3g，柠檬酸 0.4g 3% H2O2 溶液 仪器： 通风橱，医用微波炉； 四、 操
目的对比计算机图像分析与人工计数阳性细胞方法在检测GFAP阳性细胞中应用,探讨计算机图像分析代替人工计数的可行性及优缺点。方法应用正常组、癫痫组以及灵芝孢子粉组三组大鼠切25μ厚冰冻切片,常规GFAP免疫组化染色。人工计数GFAP阳性细胞,同时用Image-Pro Plus分析图片的积分光密度,对比各组间差异以及两种方法之间的相关性。结果两种方法都能检测出各组间存在差别,结果具有相关性。结论用人工计数方法和计算机图像处理结果具有正相关关系,其得出的结论也一致,在某些可代替人工技术方法用于免疫组化分析。
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