以蝴蝶兰自交品种NOⅡ的无菌苗叶片为试材,采用单因素试验和正交试验,比较不同酶的种类、酶液浓度、材料和酶液的比例、渗透压、酶解时间及纯化条件对原生质体产量和活性的影响,并用荧光显微镜观察去壁情况。结果表明:在同一种条件下1 g蝴蝶兰叶片加入10 mL酶解液中,酶解液含1.0%纤维素酶R-10,1.0%果胶酶,0.5 mol·L~(-1)甘露醇,酶解3 h,有活力的原生质体产量最高,其产量为1.3×10~5个·g~(-1),活性达81.90%。
采用ＰＥＧ（聚乙二醇）诱导原生质体融合，进行了Ｐａｇｅ桔柚（Ｃｉｔｒｕｓ ｒｅｔｉｃｕｌａｔａ Ｂｌａｎｃｏ×Ｃ．ｇｒａｎｄｉｓ Ｏｓｂ．ｃｖ．Ｐａｇｅ）九里香（Ｍｕｒｒａｙａ ｐａｎｉｃｕｌａｔｅ Ｊａｃｋ．）的体细胞杂交，培养获得了４０株再生植株，经细胞学检查和同工酶分析鉴定，确认有２株为Ｐａｇｅ桔柚九里香的体细胞杂种植株，它们均为四倍体（２ｎ＝４ｘ＝３６），具有双亲综合的谷草转氨酶（ＧＯＴ）
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