一、砧木的选择。(一)嫁接亲和力:从树木学的角度分析,旱柳和垂柳同属杨柳科柳属。生产实践证明,与垂柳亲和力的排名依次为旱柳、金丝柳、黄柳。(二)生物学特性:旱柳还具有根系发达、干性良好、寿命长、抗病虫害
为了丰富柳树分子标记的手段,以旱柳Salix matsudana为材料,通过正交实验设计法,获得适于旱柳的相关序列扩增多态性(sequence-related amplified polymorphism,SRAP)-聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)体系;对SRAP-PCR扩增过程中的2次退火温度进行优化。结果如下:优化反应体系,25.00μL反应液中,含20.84nkat的Taq酶,2.00μL Mg2+(25.00mmol·L-1),2.50μL碱基混合物(脱氧核糖核苷酸dNTPs,各2.50mmol·L-1),1.50μL引物(20.00μmol·L-1),100.00ng DNA模板,2.50μL10×Taq酶缓冲液。扩增程序,94℃2.0min;94℃1.0min,38℃1.0min,72℃1.5min,5个循环;94℃1.0min,54℃1.0min,72℃1.5min,30个循环;72℃10.0min。经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测,特征性条带清晰,信息量大,完全可以用于旱柳基因组的研究分析。
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