以N-糖基化提高毕赤酵母重组表达β-葡萄糖醛酸苷酶（PGUS-P）的热稳定性为目的,在PGUS-P模拟结构分析的基础上,半理性方法设计并通过定点突变引入具有EAS（enhanced aromatic sequence）序列特征的新N-糖基化位点,经毕赤酵母重组表达后,获得了3个新糖基化的突变酶PGUS-P-26、PGUS-P-35和PGUS-P-259。反应动力学分析表明,与原始PGUS-P相比,突变酶PGUS-P-26、PGUS-P-35和PGUS-P-259催化甘草酸水解的Km变小,Kcat/Km增加,表明其对底物甘草酸的亲和力和催化效率均得到提高。热稳定性分析表明,PGUS-P-35和PGUS-P-259的热稳定性得到改善,在65℃下保温90 min,其热稳定性相对PGUS-P分别提高了13%和11%。研究表明在蛋白质的合适位点引入糖基修饰对提高蛋白的热稳定性具有促进作用。
目的:研究珍珠梅水提取物对D-半乳糖所致大鼠急性肝损伤的防护作用。方法:50只大鼠随机分为正常组、模型组、大和小剂量给药组、阳性对照组5个组。给药组按10g/kg、5g/kg剂量以珍珠梅水提取物灌胃;阳性对照组按0.2g/kg剂量以联苯双酯灌胃;正常组、模型组以等体积生理盐水灌胃;共5天。第4天,模型组和给药组按0.5g/kg剂量腹腔注射D-半乳糖,正常组腹腔注射等体积生理盐水。腹腔注射D-半乳糖24小时后,摘眼球取血,用比色分析法测定大鼠血清AST、ALT的活性,血清和线粒体超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione perioxidase,GSH-PX)的活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量。结果:珍珠梅水提物显著降低因D-半乳糖所引起的大鼠血清ALT、AST的升高;对血清SOD、GSH-PX活性有明显的升高作用;对MDA含量有降低作用。结论:珍珠梅水提物对D-半乳糖所致大鼠急性肝损伤有防护作用。
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