建立高效液相色谱法测定广玉兰中小白菊内酯含量的方法.采用ZORBAX SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)―水(B)为流动相,梯度洗脱(0～10 min,10%→48%A;10～20 min,48%→80%A),流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长210 nm.结果表明,小白菊内酯的线性范围为0.188～2.820μg(r=0.999 9),平均回收率(n=9)为99.3%.证实该方法简便、准确、重复性好,可用于广玉兰中小白菊内酯的含量测定.
本文建立了适合中国菊花种质资源长期保存的玻璃化超低温保存技术体系。在4℃下,把1~2mm的菊花茎尖放在含0.4mol/L蔗糖的MS培养基上暗培养2~3d,用预处理液在25℃下处理30min,再用玻璃化试剂PVS2在冰浴条件下处理15min,换新鲜的PVS2试剂并迅速投入液氮。液氮保存24h后,40℃水浴解冻2min,用含蔗糖1.2mol/L的MS液体培养基洗涤20min,滤纸吸干后接种到恢复培养基中,在25℃条件下弱光培养1~3d转入正常光照培养条件下培养,2周后成活率可达86%以上,成活的茎尖均可再生。
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