生物监测

农业环境学上: 生物监测是指利用生物对环境中污染物质的反应，即在各种污染环境下所发出的各种信息，来判断环境污染状况的一种手段，对污染物敏感的生物种类，都可以作为监测生物。

又称"生物测定"。利用生物对环境中污染的物质的敏感性反应来判断环境污染的一种手段。用来补充物理、化学分析方法的不足。如利用敏感植物监测大气污染;应用指示生物群落结构、生物测试及残毒测定等方法，反映水体受污染的情况。 基本信息

生物监测方法的建立是以环境生物学理论为基础的。根据监测生物系统的结构水平、监测指示及分析技术等，可以将生物监测的基本方法大致分为四大类，即生态学方法、生理学方法、毒理学方法及生物化学成分分析法。

这里说用的生物主要包括:海藻、水蚤、斑马鱼、豆芽等等，操作起来比较繁琐，实验周期较长，无法现场快速检测和在线长期监测，目前另外一种生物:发光细菌倍受用户的青睐，所用设备分别有实验室用、便携式、在线式，其中进口设备居多如美国、以色列、德国、荷兰，价格昂贵，尤其是菌种的后期采购时间周期长，且菌种易失活;国产设备有中科院南京土壤所、上海上立、北京滨松光子，价格低廉，售后服务快捷，其中北京滨松公司设备灵敏度可以与美国设备相媲美，希望能增加研发力度，为国产设备增添影响力

主要有:①利用指示生物来监测，如根据颤蚓、蛭等大型底栖无脊椎动物和摇蚊幼虫，以及某些浮游生物在水体中的出现和消失、数量的多少等来监测水体的污染状况。利用污水生物系统监测水体污染也是一种常用的手段。②利用水生生物群落结构的变化来监测。水质状况发生变化，水生生物群落结构也会发生相应的改变。在有机物污染严重、溶解氧很低的水体中，水生生物群落的优势种只能由抗低溶解氧的种类组成;未受污染的水体，水生生物群落的优势种则必然是一些清水种类。在利用指示生物和群落结构监测水体污染时，还引用了生物指数和生物种的多样性指数等数学手段，简化监测的方法。③水污染的生物测试，即利用水生生物受到污染物的毒害所产生的生理机能的变化，测试水质污染的状况。这种方法可以测定水体的单因素污染，对测定复合污染也能收到良好的效果。测试方法分为静水式生物测试和流水式生物测试。

对土壤污染进行生物监测也是一种可行的途径，但国内外做的工作还不多。环境系统十分复杂，生物监测只有与物理、化学监测结合起来，才能取得更好的效果。

生物监测工作是20世纪初在一些国家开展起来的。70年代以来，水污染的生物监测成了活跃的研究领域。1977年美国试验和材料学会(ASTM)出版了《水和废水质量的生物监测会议论文集》，内容包括利用各类水生生物进行监测和生物测试技术，概括了这方面的成就和进展。同年非洲的尼日利亚科学技术学院用远距离电报记录甲壳动物的活动电位监测烃类、油类以及其他污染物的室内试验也取得初步结果。还有人提出了以鱼的呼吸和活动频度为指标的、设在厂内和河流中的自动监测系统。国外对于植物与大气污染的关系做了很多调查研究工作，已选出一批敏感的指示植物和抗性强的耐污植物。

中国近年来在环境污染调查中，也开展了生物监测工作，例如对北京官厅水库、湖北鸭儿湖、辽宁浑河等水体的生物监测，利用鱼血酶活力的变化反映水体污染，用底栖动物监测农药污染等，都取得一定成果。在利用植物监测大气污染方面，也进行了大量研究。

用于生物监测的手段很多。大气污染的生物监测手段主要有:①利用指示植物监测大气污染，主要是根据各种植物在大气污染的环境中叶片上出现的伤害症状，对大气污染作出定性和定量的判断。②测定植物体内污染物的含量，估测大气污染状况。③观察植物的生理生化反应,如酶系统的变化、发芽率的降低等，对大气污染的长期效应作出判断。④测定树木的生长量和年轮等，估测大气污染的现状和历史。⑤利用某些敏感植物(如地衣、苔藓等)制成大气污染植物监测器，进行定点观测(见大气污染的生物监测)。

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该压力蒸汽灭菌生物培养指示剂用于压力蒸汽灭菌效果的生物监测(包括下排气锅和预真空锅);通过培养基颜色变化，反应嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活，从而判断压力蒸汽灭菌生物监测结果。

1. 将压力蒸汽灭菌生物培养指示剂放于一标准测试包中;

2. 按照国家规范, 分别将测试包放于锅内不同位置;

3. 灭菌完毕, 取出该生物指示剂;

4. 挤破内含的安瓿, 与一支对照管一起放于56℃培养锅内培养;48小时后阅读结果。

结果阅读:

1.培养后指示管不变色(呈紫色), 表示灭菌通过;

2.培养后指示管变色(呈黄色), 表示灭菌不通过,(必须及时查出灭菌失败原因)。

3.同时培养的对照管应为阳性(呈黄色), 如阴性,可能的原因为: 培养条件不符合要求; 生物指示剂有问题; (应及时查出阴性原因)。

注意事项:

1. 灭菌完毕, 含生物指示剂的包裹很热并有一定压力; 需至少冷却10分钟以上, 否则可能引起塑料管内的安瓿破裂, 飞溅的碎片导致损伤;

2. 只有对照管为阳性, 其生物监测结果才算有效。

3. 贮存于室温: 15-30℃; 相对湿度为35-60%;避免靠近灭菌器和化学消毒剂。

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该生物指示剂可用以121℃下排气和132℃预真空压力蒸汽灭菌锅。

3M™ ATTESTTM压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速)在与3M ATTEST 290 培养锅共用时, 通过酶活性的灭活与否，探测嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活，从而判断压力蒸汽灭菌结果。

使用方法:

1-在生物指示剂标签上注明灭菌器锅号, 负荷数量, 灭菌日期; 不要在指示剂的瓶或盖上另贴一个标签。将生物指示剂放于一个标准测试包内，并置于最难灭菌的位置。

2- 将含有生物指示剂的测试包放在灭菌器最难灭菌的位置，通常是灭菌器底层，近门或排气口上面。

3- 正常装载。

4-灭菌循环完毕, 取出生物指示剂。

5- 灭菌结束后，从灭菌器内取出含有生物指示剂的测试包，打开散热5分钟后才能取出生物指示剂。同时在压碎安瓿之前，让生物指示剂在培养锅外再冷却10分钟后才能压碎，然后进行生物培养。

6-检查生物指示剂标签上的化学指示剂，颜色由玫瑰色变成棕色证明生物指示剂经过压力蒸汽灭菌过程的处理。该颜色的变化并非表明该处理达到灭菌的目的，如果化学指示剂没有变化，请检查灭菌过程。

7-戴上防护眼镜，挤碎安瓿，然后培养生物指示剂。详细步骤请参阅3M ATTEST 290 培养锅操作说明。

8-每次培养须同时培养一个未灭菌过的生物指示剂进行阳性对照，阳性对照生物指示剂与经过灭菌处理的生物指示剂为相同生产日期和批号。

阳性对照的目的是保证:1)-正确的培养条件

2)-指示剂的活性(不适当的贮存条件可能影响有效期内的指示剂活性)

3)-3M ATTEST 290 培养锅功能完好

9-在3M ATTEST 290 培养锅(培养温度62+/-20C)内，培养阳性对照和已处理的指示剂3小时，读出最终结果。阳性对照必须得出荧光阳性结果(阅读器显示为红灯或+)，如阳性对照读出荧光阴性(绿灯或-)，应检查培养锅温度和操作过程，直至阳性对照为阳性结果，生物监测的结果才是有效的。对于经过灭菌处理的指示剂，荧光阳性(红灯或+)表明灭菌过程失败，荧光阴性(绿灯或-)表明灭菌过程合格。

10-如果需要通过颜色变化检测生物监测结果，应将生物指示剂放在培养锅内继续培养。同时随时监测阳性结果的出现，如8、12、24，直至168小时(7天)，最终视觉效果应在168小时(7天)得出。黄色表明细菌生长，灭菌过程失败。168小时(7天)没有颜色变化(培养基为紫色)表明灭菌过程合格。

11-对任何为阳性生物监测结果应立即采取行动，如追回同锅次的灭菌物品，和寻找原因。直至生物指示剂的结果呈阴性。

注意事项:

冷却之前压碎或过度处理生物指示剂可能导致玻璃安瓿的破碎, 飞溅的碎屑会使人员受伤; 因此建议在从灭菌器内取出生物指示剂时戴防护眼镜和手套, 在压碎生物指示剂时也需要戴防护眼镜。

禁忌:该生物指示剂不能用于121℃预真空和132℃下排气压力蒸汽灭菌锅，及干热、化学蒸汽、环氧乙烷和其他的低温灭菌过程的生物监测。

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3M™Attest™压力蒸汽灭菌标准生物测试包能够可靠地检测压力蒸汽灭菌过程的生物监测结果。通过培养基颜色变化，反应嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活，从而判断压力蒸汽灭菌生物监测结果。该生物测试包用于132℃预真空压力蒸汽灭菌器时在132℃运行≥4分钟。

1-在生物测试包标签上注明灭菌器，负荷数，灭菌日期，将测试包置于灭菌器最难灭菌的位置。

2-最难灭菌的位置，通常是底层，近门或排气口上面。

3-正常装载。

4-灭菌循环完毕，取出生物测试包。

注意事项:

冷却之前压碎或过度挤压生物指示剂可能导致玻璃安瓿瓶的破碎，飞溅的碎屑会使人员受伤。因此建议在从灭菌器内取出生物测试包时戴防护眼镜和手套，在从测试包内取出及压碎生物指示剂时也需要戴防护眼镜。

1-从灭菌器内取出测试包，打开散热5分钟后才能取出生物指示剂，在压碎之前，让生物指示剂在培养器外再冷却10分钟后才能压碎。

2-检查生物指示剂标签上的化学指示剂，颜色由玫瑰色变成棕色证明生物指示剂经过压力蒸汽灭菌过程的处理。该颜色的变化并非表明该处理达到灭菌的目的，如果化学指示剂没有变化，请检查灭菌过程。

3-戴上防护眼镜，挤碎安瓿瓶，然后在56±2°C培养生物指示剂。

4-每次培养须同时培养一个未处理的测试包的生物指示剂进行阳性对照，包内阳性对照生物指示剂与处理的生物指示剂为相同制造日期和标号。

阳性对照的目的是保证:1)-正确的培养条件

2)-指示剂的活性(不适当的贮存条件可影响有效期内的指示剂活性)

3)- 培养基促进细菌快速生长的能力

5-通过颜色变化检测生物监测结果，随时监测阳性结果出现，如8、12、24，直至48小时(2天)。最终视觉效果应在48小时(2天)得出。黄色表明细菌生长，灭菌过程失败。48小时(2天)没有颜色变化(培养基为紫色)表明灭菌过程合格。

8-对任何为阳性生物监测结果应立即采取行动，直至生物指示剂的结果呈阴性。

禁忌:该生物指示剂不能用于121℃预真空和132℃下排气压力蒸汽灭菌锅，及干热、化学蒸汽、环氧乙烷和其他的低温灭菌过程。

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3M™Attest™压力蒸汽灭菌标准生物测试包(快速) 内含有3M™压力蒸汽灭菌生物指示剂(快速)，在与3M™Attest™阅读器配合使用时，能够迅速可靠地检测压力蒸汽灭菌过程的生物监测结果。

通过阅读器观测荧光发生与否或者后继培养基颜色变化与否，反应嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活，从而判断压力蒸汽灭菌生物监测结果。该生物测试包用于132℃预真空压力蒸汽灭菌器时在132℃运行≥4分钟。

1-在生物测试包标签上注明灭菌器，负荷数，灭菌日期，并将测试包置于灭菌器最难灭菌的位置。

2-最难灭菌的位置，通常是底层，近门或排气口上面。

3-正常装载。

4-灭菌循环完毕，取出生物测试包。

注意事项:

冷却之前压碎或过度挤压生物指示剂可能导致玻璃安瓿瓶的破碎，飞溅的碎屑会使人员受伤。因此建议在从灭菌器内取出生物测试包时戴防护眼镜和手套，在从包内取出生物指示剂及压碎时也需要戴防护眼镜。

1-从灭菌器内取出测试包，打开散热5分钟后才能取出生物指示剂，在压碎之前，让生物指示剂在阅读器外再冷却10分钟后才能压碎，不要用手指压碎玻璃安瓿瓶。

2-检查生物指示剂标签上的化学指示剂，颜色由玫瑰色变成棕色证明生物指示剂经过压力蒸汽灭菌过程的处理。该颜色的变化并非表明该处理达到灭菌的目的，如果化学指示剂没有变化，请检查灭菌过程。

3-戴上防护眼镜，挤碎安瓿瓶，然后培养生物指示剂。详细步骤请参阅Attest™290阅读器操作说明。

4-每次培养须同时培养一个未处理的生物测试包的指示剂进行阳性对照，包内阳性对照生物指示剂与处理的生物指示剂为相同制造日期和标号。

阳性对照的目的是保证:1)-正确的培养条件

2)-指示剂的活性(不适当的贮存条件可影响有效期内的指示剂活性)

3)-Attest™阅读器功能完好

5-在Attest™阅读器60+/-20C内，培养阳性对照和已处理的指示剂3小时，读出最终结果。阳性对照必须得出荧光阳性结果(阅读器显示为红灯或+)，如阳性对照读出荧光阴性(绿灯或-)，应检查阅读器温度和紫外灯，直至阳性对照为阳性结果，生物监测的结果才是有效的。对于经过灭菌处理的指示剂，荧光阳性(红灯或+)表明灭菌过程失败，荧光阴性(绿灯或-)表明灭菌过程合格。

6-如果通过颜色变化检测生物监测结果，应在阅读器内继续培养，如培养基仍为紫色，检查阅读器温度和贮存条件。该指示剂应在专门的阅读器60+/-20C的湿性环境中培养，避免干燥。随时监察阳性结果的出现,如8、12、24，直至168小时(7天)。最终视觉效果应在168小时(7天)得出。黄色表明细菌生长，灭菌过程失败。168小时(7天)没有颜色变化(培养基为紫色)表明灭菌过程合格。

7-对任何阳性生物监测结果应立即采取行动，直至生物测试包内生物指示剂的结果呈阴性。

禁忌:该生物测试包不能用于121℃预真空和132℃下排气压力蒸汽灭菌锅，及干热、化学蒸汽、环氧乙烷和其他的低温灭菌过程。

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该产品用于压力蒸汽灭菌过程常规检测。该产品用于121°C(≥30分钟)下排气或132°C(≥4分钟)预真空压力蒸汽灭菌器中装载棉布包、金属器械及硬质容器等的灭菌监测。每个测试包含一个1292 3M™ATTEST™压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速)(棕色瓶盖)，一片记录卡，和一个1243 3MTM压力蒸汽灭菌包内化学指示卡(爬行式)。在蒸汽条件下，化学指示卡中的黑色颜料染料条达到或通过ACCEPT区，并且1292安瓿瓶上的化学指示剂由玫瑰色变为棕色，同时培养和阅读1292生物指示剂。

1292 3M™ATTEST™压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速) 是一种双重阅读生物指示系统，当结合3M ATTEST 190/290阅读器共用时，可以快速可靠的监测压力蒸汽灭菌过程。1292 3M™ATTEST™压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速) 通过酶活性的灭活与否，探测嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活。通过非荧光培养基中酶分解产生的荧光剂来检测酶的存在。荧光剂的产生可以通过3M ATTEST 190/290阅读器检测。荧光剂的变化指示压力蒸汽灭菌过程失败。

1292 3M™ATTEST™压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速) 也可以通过可见的颜色变化判断嗜热脂肪杆菌芽孢的存在。嗜热脂肪杆菌芽孢的繁殖和代谢会产生酸性副产品，pH降低导致培养基颜色由紫色变为黄色，指示压力蒸汽灭菌过程的失败。然而，由于3小时荧光结果的高灵敏性，就没必要培养1292 3M™ATTEST™压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速)超过3小时。

使用方法:

1. 将该测试包标签朝上放在满负载的灭菌器中最难灭菌的区域，通常为灭菌器底层、近门处和排气口上方。

2. 按照程序运行灭菌循环。

3. 灭菌循环结束后，佩戴好防护眼镜和手套将灭菌器的门完全打开冷却至少5分钟，然后取出测试包。

4. 打开测试包冷却5分钟，然后取出生物指示剂再冷却10分钟后才能压碎。

5. 取出指示剂。

6. 阅读1243化学指示卡。当黑色颜料块到达化学指示卡的ACCEPT窗口时说明整个灭菌负荷达到灭菌条件;当黑色颜料块没有到达化学指示卡的ACCEPT窗口时即在REJECT区域时说明未达到灭菌条件。视为灭菌失败，此时须察看灭菌过程。

7. 检查1292生物指示剂标签上的化学指示剂，颜色由玫瑰色变成棕色证明生物指示剂经过压力蒸汽灭菌过程的处理。该颜色的变化并非表明该处理达到灭菌的目的，如果化学指示剂没有变化，请检查灭菌过程。

8. 在1292生物指示剂标签上注明灭菌器锅号, 负荷数量, 灭菌日期。

9. 在记录卡和1243化学指示卡背面填写必要的灭菌信息作为永久记录;记录生物指示剂的监测结果。

10. 丢弃测试包，因为该测试包为一次性使用，反复使用导致测试结果无效。

11. 戴上防护眼镜，挤碎安瓿，然后培养生物指示剂。详细步骤请参阅3M ATTEST 190/290 培养锅操作说明。

12. 每次培养须同时培养一个未灭菌过的1292生物指示剂进行阳性对照，阳性对照生物指示剂与经过灭菌处理的生物指示剂为相同生产日期和批号。

13. 在阳性对照1292指示剂标签上注明"C"和日期。挤碎安瓿，然后培养阳性对照生物指示剂。详细步骤请参阅3M ATTEST 190/290 培养锅操作说明。

14. 在3M ATTEST 190/290 培养锅内，培养阳性对照和已处理的指示剂3小时，读出最终结果。

15. 得到结果后，可丢弃生物指示剂。也可以通过阳性对照生物指示剂的目测颜色变化来指示蒸汽灭菌过程。这样可以确保:

 正确的培养条件

 指示剂的活性(不适当的贮存条件可能影响有效期内的指示剂活性)

 培养基的能力

3M ATTEST 190/290 培养锅功能完好

黄色表明细菌生长，灭菌过程失败。没有颜色变化表明灭菌过程合格。最终阴性结果应在培养48小时后得出。阳性对照为阳性结果时，生物监测的结果才是有效的。

16. 记录经过灭菌过程和阳性对照指示剂的结果。对任何结果为阳性的生物监测结果应立即采取行动。如追回同锅次的灭菌物品，和寻找原因。直至生物指示剂的结果呈阴性。

警告:

冷却之前压碎或过度处理生物指示剂可能导致玻璃安瓿的破碎，飞溅的碎屑会使人员受伤，因此需要注意以下事项:

 将安瓿瓶挤碎前需要冷却一定时间

 从灭菌器内取出生物指示剂时戴防护眼镜和手套

 在压碎生物指示剂时也需要戴防护眼镜

 不要用手指直接挤碎玻璃安瓿瓶

 不要在手指间滚动瓶子避免弄湿孢子带

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用途:用于环氧乙烷灭菌锅的生物监测;

机理:芽胞为枯草杆菌黑色变种芽胞, 选用标准抗力仪测试: 存活时间大于或等于15分钟, 杀灭时间小于或等于60分钟.

使用方法:

1. 将环氧乙烷灭菌生物培养指示剂放于一标准测试包中;

2. 按照国家规范, 分别将测试包放于锅内不同位置;

3. 灭菌完毕, 取出生物指示剂;

4. 挤破内含的安瓿, 与一支对照管一起放于37℃培养锅培养;

5. 48小时后, 阅读结果。

阅读方法:

1. 培养后, 灭菌管不变色(呈绿色), 表示灭菌通过;

2. 培养后, 灭菌管变色(呈黄色), 表示灭菌不通过;(必须及时查出灭菌失败原因)。

3. 同时培养的对照管应为阳性(呈黄色), 如阴性,可能的原因为: 培养条件不符合要求; 生物指示剂问题;(应及时查出阴性原因)。

如何丢弃:阳性的指示剂, 须环氧乙烷灭菌后丢弃.

有效期: 自生产日期起为2年。

保存方法:

1. 贮存于室温: 15-30℃; 相对湿度为35-60%;

2. 避免靠近灭菌器和化学消毒剂。

注意事项:只有对照管为阳性, 其生物监测结果才能有效。

建议使用:建议每锅均应放生物指示剂监测, 用于考核整个负荷的灭菌质量。

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3MTM 环氧乙烷灭菌快速生物培养指示剂在与3M ATTEST 阅读器共同使用时, 能够迅速可靠地观察环氧乙烷灭菌过程。

工作原理:

枯草杆菌黑色变种芽胞在特定条件下, 存活时间大于或等于15分钟，杀灭时间小于或等于60分钟。

枯草杆菌黑色变种芽胞生长过程中会自然产生-葡萄糖苷酶，采用专门配置的生物指示剂阅读器可以检测到酶衰减过程中而产生的荧光物质。经过4个小时的培养，如果检测到荧光物质，则说明灭菌过程失败;如果检测不到荧光物质，则说明灭菌过程成功。

观察频度:

应放在适当的测试包和包裹内，用来观察每次灭菌过程的质量。

使用范围:

3MTM 环氧乙烷灭菌生物培养指示剂(快速)适用于监测:

1-100%环氧乙烷灭菌过程。

2-所有氟里昂(CFC)和氢化氟里昂(HCFC)与环氧乙烷混合物的灭菌循环。

警告:

生物指示剂塑料管内有一玻璃安瓿。

· 冷却之前压碎或过度处理生物指示剂可能导致玻璃安瓿的破碎, 飞溅的碎屑会导致人员受伤。

· 建议从灭菌器内取出生物指示剂时戴防护眼镜和手套,。

· 压碎生物指示剂时戴防护眼睛。

· 压碎和敲击生物指示剂应关闭帽子。

· 不要用手指压碎玻璃安瓿。

· 不要在手指间捻搓生物指示剂菌片使其湿润。

注意事项:

不要用3MTM 环氧乙烷灭菌快速生物培养指示剂监测:

1-压力蒸汽灭菌过程。

2-干热，化学气体或其它低温灭菌过程。

使用说明:

1. 在生物指示剂标签上注明灭菌器, 负载数, 处理日期; 不要在指示剂的瓶或盖上另贴一个标签。

2. 按照消毒学技术规范将生物指示剂放于一个合适的测试包内和最难灭菌的位置，避免将指示剂和化学指示卡放在一起，以免引起荧光物质转移。

3. 将指示剂放在满负载最难灭菌的位置，通常是负载的中间。

4. 正常装载。

5. 灭菌过程完毕, 两种方法取出:

A. 通风前取出指示剂测试包:

按照厂家要求打开灭菌器门，取出测试包。从测试包内取出生物指示剂和化学指示卡。将测试包其余物品放回锅内。

B. 通风后取出指示剂测试包:

测试包的通风时间同锅内其它包裹相同。通风完毕，从测试包内取出生物指示剂和化学指示卡。按照医院要求丢弃其余物品。

6 检查指示剂上的化学标签。暴露于环氧乙烷灭菌过程的标签颜色变成绿色。此颜色变化不能表示此过程足够达到无菌。如果化学指示剂没有变化, 请检查灭菌过程。

7 戴上防护眼镜, 按压帽下，挤碎安瓿, 抓住指示剂在硬表面敲击直到菌片被培养基润湿。然后培养指示剂; 详细步骤请参阅ATTEST生物指示剂专门的培养器操作说明。

8 每次培养须至少同时培养一个未处理的生物指示剂( 阳性对照)，阳性对照生物指示剂与灭菌过的生物指示剂应该有相同的制造日期和标号。

9 在专门的培养锅内(372C)培养阳性对照和已灭菌的生物指示剂4小时; 读出最终结果. 详细步骤请参阅生物指示剂专用的ATTEST培养器操作说明。2和3小时可早期发现阳性对照和阳性灭菌管。丢弃灭菌过的生物指示剂。

10 要得出视觉上颜色变化, 应在培养锅内继续培养48小时; 如培养基变为黄色, 表明生物指示剂为阳性; 如培养基仍为紫色, 表明生物指示剂为阴性。

阳性对照的目的是保证:

· 正确的培养条件。

· 指示剂的活性。

· 快速的培养基及合适的阅读器。

阅读结果:

1. 阳性对照的生物指示剂必须得出阳性的荧光结果(红灯或+); 如阳性对照的生物指示剂读出阴性荧光结果(绿灯或-), 应检查培养锅温度和紫外灯; 重新试验得出新的阳性对照生物指示剂，直至为阳性的荧光结果, 灭菌后的指示剂结果才是有效的。对于灭菌后的指示剂, 阳性的荧光结果(红灯或+)表明灭菌过程失败; 阴性荧光结果(绿灯或-)表明灭菌过程可以接受。

2. 对任何生物指示剂为阳性的结果，应立即冻结灭菌物品，检查灭菌过程直至生物指示剂的结果呈阴性。

3. 在丢弃前应对任何阳性生物指示剂进行灭菌。

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3M™环氧乙烷快速生物测试包内含有"3MTM环氧乙烷灭菌快速生物培养指示剂"，可对常规的环氧乙烷或其它混合型的环氧乙烷气体灭菌过程进行监测，用于环氧乙烷灭菌器的装载过程控制。

工作原理:

枯草杆菌黑色变种芽胞在特定条件下, 存活时间大于或等于15分钟，杀灭时间小于或等于60分钟。

枯草杆菌黑色变种芽胞生长过程中会自然产生-葡萄糖苷酶，采用专门配置的生物指示剂阅读器可以检测到酶衰减过程中而产生的荧光物质。经过4个小时的培养，如果检测到荧光物质，则说明灭菌过程失败;如果检测不到荧光物质，则说明灭菌过程成功。

使用方法:

1-在生物测试包可上注明灭菌器号，装载号，灭菌日期，将测试包置于灭菌器最难灭菌的位置。

2-最难灭菌的位置，通常是负载的中间。

3-正常装载。

4-灭菌过程完毕, 取出测试包。

5-检查3M™环氧乙烷灭菌快速生物培养指示剂上的化学标签。暴露于环氧乙烷灭菌过程的标签颜色变成绿色。此颜色变化不能表示此过程足够达到无菌。如果化学指示剂没有变化, 请检查灭菌过程。

6-在生物指示剂标签上注明灭菌器号, 装载号, 灭菌日期。

7-丢弃余下的测试包。如果重复使用该测试包，会导致测试结果无效。

8-戴上防护眼镜, 按压帽下，挤碎安瓿, 抓住指示剂在硬表面敲击直到菌片被培养基润湿。然后培养指示剂。详细步骤请参阅3M™环氧乙烷灭菌快速生物培养指示剂专门的培养器操作说明。

9-每次培养须至少同时培养一个未处理的生物指示剂( 阳性对照)，阳性对照生物指示剂与灭菌过的生物指示剂应该有相同的生产日期和批号。

阳性对照的目的是保证:

 正确的培养条件。

 芽孢的生物活性。

 培养基(复苏芽孢的能力)的活性。

10-在专门的培养锅内(37±2oC)培养阳性对照和已灭菌的生物指示剂4小时; 读出最终结果。丢弃灭菌过的生物指示剂。详细步骤请参阅生物指示剂专用的ATTEST培养器操作说明。

阅读结果:

1. 阳性对照的生物指示剂必须得出阳性的荧光结果(红灯或+); 如阳性对照的生物指示剂读出阴性荧光结果(绿灯或-), 应检查培养锅温度和紫外灯; 重新试验得出新的阳性对照生物指示剂，直至为阳性的荧光结果, 灭菌后的指示剂结果才是有效的。对于灭菌后的指示剂, 阳性的荧光结果(红灯或+)表明灭菌过程失败; 阴性荧光结果(绿灯或-)表明灭菌过程可以接受。

2. 对任何生物指示剂为阳性的结果，应立即冻结灭菌物品，检查灭菌过程直至生物指示剂的结果呈阴性。

3. 在丢弃前应对任何阳性生物指示剂进行灭菌。

注意事项:

1-在灭菌开始前，不要打开测试包。

2-不要用该测试包监测压力蒸汽灭菌过程、干热、化学气体或其它低温灭菌过程。

3-只有对照管为阳性, 其生物监测结果才算有效。

保存方法:

贮存于室温，相对湿度为35%-60%，避免靠近灭菌器和化学消毒剂。